活細胞分析儀是一種集成了自動化成像、環境控制與智能分析技術的先進設備,其核心功能圍繞長時間動態監測、多維度數據采集及智能化分析展開,為細胞生物學研究提供高效、精準的解決方案。以下是其核心功能的詳細解析:
一、自動化與長時間動態監測
1.定時連續成像
預設時間間隔:用戶可自定義拍攝頻率(如每10分鐘、1小時或24小時),實現細胞生長、分化、凋亡等過程的連續記錄。
72小時+穩定運行:設備整體置于培養箱內,維持恒定溫度(37℃)、CO?濃度(5%)及濕度,避免頻繁取出細胞導致的環境干擾,確保數據連續性。
應用場景:追蹤干細胞分化、腫瘤細胞增殖、藥物處理后的細胞響應等長期動態過程。
2.多位置自動掃描
高通量檢測:支持96孔板、384孔板或多塊培養皿的自動掃描,單次實驗可處理數百個樣本,大幅提升通量。
智能定位:通過電動載物臺與圖像識別技術,自動定位并聚焦目標細胞區域,減少人為操作誤差。
二、多模態成像技術
1.明場與熒光雙模式成像
明場成像:無需標記,直接觀察細胞形態、密度及運動軌跡,適用于細胞匯合度分析、劃痕實驗等。
熒光成像:支持UV/B/G三色熒光通道,可標記特定蛋白(如GFP標記的融合蛋白)、細胞器(如MitoTracker標記線粒體)或死亡信號(如Annexin V-FITC標記凋亡細胞)。
多標記共定位:通過多通道熒光疊加,分析蛋白質間相互作用或細胞器動態變化。
2.三維Z軸堆疊成像
電動Z軸控制:精度達0.1μm,可實現細胞或類器官的三維結構重建。
應用場景:分析干細胞在三維支架中的分化行為、腫瘤球體的內部結構或胚胎發育中的空間異質性。
3.低光毒性設計
紅色LED光源:采用625nm紅色LED(如明美MCS31),光毒性顯著低于傳統汞燈或氙燈,支持長時間連續成像而不損傷細胞。
全密封光路:避免外界光線干擾,同時減少熒光標記物的光漂白。
三、智能化圖像分析與數據處理
1.AI驅動的細胞識別與分類
形態學分析:自動識別細胞邊界、核質比、細胞面積等參數,計算細胞增殖率、凋亡率或分化比例。
深度學習分類:通過訓練模型區分不同細胞類型(如干細胞、分化細胞、死亡細胞)或亞細胞結構(如線粒體、內質網)。
軌跡追蹤:記錄單個細胞或細胞群體的遷移路徑,分析細胞運動模式(如趨化性、集體遷移)。
2.實時數據分析與預警
遠程監控:支持手機或電腦端實時查看實驗進度,調整拍攝參數或終止實驗。
郵件提醒:當細胞匯合度達到預設閾值或發生異常事件(如大量細胞死亡)時,自動發送警報。
自動報告生成:實驗結束后,軟件自動生成包含圖像、數據圖表及統計結果的報告,簡化數據整理流程。
3.多參數關聯分析
時間序列分析:繪制細胞形態、熒光強度或運動速度隨時間的變化曲線,揭示動態規律。
空間統計分析:結合三維成像數據,分析細胞在空間中的分布模式(如邊緣聚集、核心凋亡)。
藥物劑量響應曲線:通過高通量檢測,快速篩選不同藥物濃度對細胞的影響,生成IC50值等藥效學參數。
四、環境控制與細胞活性保障
1.培養箱集成設計
恒溫恒濕:內置溫控系統與加濕裝置,維持細胞生長所需環境。
氣體控制:支持CO?濃度調節(0-20%),適用于需特殊氣體環境的細胞類型(如低氧培養的腫瘤細胞)。
防污染設計:全封閉光路與HEPA過濾系統,降低微生物污染風險。
2.非侵入式監測
無需取出細胞:所有成像與分析均在培養箱內完成,避免傳統方法中細胞轉移導致的應激反應。
低干擾標記:支持活細胞可滲透的熒光染料(如鈣黃綠素-AM),減少標記對細胞功能的干擾。
五、典型應用場景
1.干細胞研究
追蹤干細胞分化為特定細胞類型(如神經元、心肌細胞)的過程,分析分化效率與關鍵調控因子。
構建三維類器官模型,研究干細胞在復雜環境中的行為。
2.藥物研發
高通量篩選影響細胞增殖、凋亡或分化的藥物,評估藥效與毒性。
觀察藥物處理后細胞的動態響應(如膜通透性變化、炎癥因子釋放)。
3.腫瘤生物學
分析腫瘤細胞遷移、侵襲能力,研究抗腫瘤藥物對細胞運動的影響。
構建腫瘤球體模型,模擬體內腫瘤微環境中的細胞相互作用。
4.神經科學
追蹤神經元軸突生長、突觸形成過程,研究神經發育疾病機制。
觀察神經退行性疾病模型中細胞死亡(如凋亡、焦亡)的動態特征。